그림 3은 대규모 항원 정제를위한 항체와 결합 된 셀 루핀 포름의 사용을 보여줍니다 이 적용에서 셀 루핀 친 화성 컬럼은 높은 수율에서 항원의 상당한 농도 및 정제를 제공한다 대상 컬럼은 30 개월 이상 사용되어 성능이 상당한 저하없이 3,000 리터 이상의 시작 혈장을 처리했습니다

겔을 생산하기 위해, 항 -HBS Ag 항체를 함유 한 45 리터의 말 혈청을 먼저 농축시키고 황산염 침전에 의해 정제하고 01 M NACL로 02M 인산염 (pH 7)으로 투석 하였다 생성 된 항체 혈청을 12 리터의 셀 루핀 포르 실에 첨가하고 80 그램의 NACNBH₃4 ~ 8 ° C에서 24 시간 동안 이어서, 항체 겔을 완충제로 세척하고 컬럼에 포장 하였다 공정 스트림은 동결-해동, 원심 분리, 암모늄 황산염 침전 및 겔 여과 크로마토 그래피에 의해 이전에 정제 된 HBS Ag에 대해 양성으로 구성되었다

Cellufine Formyl은 그림 4에 도시 된 바와 같이 당 단백질 정제를위한 강의를 고정시키는 데 사용될 수있다 Con A (50mg)는 AT에서 반응함으로써 05g (습식)의 셀 루핀 포피 실에 고정되었다
4 ° C 1mm의 1ml (pH 64)에서 1ml에서 밤새 1mm mgcl₂1높은 처리량을위한 실험실 및 프로세스 열의 높은 유량₂및 1mm CACL₂Methyl-Alpha-D-Mannoside 및 NACNBH의 존재하에₃물로 세척 한 후, 겔을 NACNBH로 1% 글루 타르 알데히드의 2ml로 밤새 4 ℃에서 현탁시켰다₃두 번째 물 세척 후 겔을 1M TRIS/HCL (pH 74)의 2ml에서 실온에서 1 시간 동안 현탁시키고 다시 씻었다

Formyl 기능 그룹의 가용성은 최적의 반응 조건 (pH, 온도, 활성제, 반응 농도 등)을 위해 미디어를 선택하는 데 큰 유연성을 허용합니다 무료 슬롯 formyl은 응용 그룹에 최적화 된 높은 안정성, 기능적 포장입니다 반응 화학 및 리간드 밀도의 제어는 간단합니다

Cellufine Formyl 패킹의 Aldehyde 활성 그룹은 리간드의 1 차 아민 그룹과 반응하여 Schiff의 기본 복합체를 형성합니다 (그림 5 참조) 가벼운 환원제는 Schiff의베이스를 매우 안정적인 연결로 변환하는 데 사용됩니다 표 2는 일반적인 리간드 커플 링 프로토콜을 보여줍니다

무료 슬롯 formyl은 매우 안정적인 연결을 형성하기위한 환원제를 필요로한다 사실상 모든 응용 분야에서 좋은 결과를 얻기 위해 다수의 환원제를 사용할 수 있습니다 제제는 합리적인 반응 속도를 생성하기 위해 선택되어야하지만 단백질 리간드 (예 : 이황화 결합의 감소에 의한) 또는 알데히드 그룹을 감소시키는 것만 큼 강하지 않아야한다 나트륨 보로 하이드 라이드 (NABH₄), 나트륨 시아 노보로 하이드 라이드 (NACNBH₃) 및 새로운 비 독성 환원제 Trimethylamine Borane ((CH₃)₃1스페이서 길이 (원자)₃)는 특정 요구 사항에 따라 성공적인 에이전트입니다 모든 에이전트의 경우, 필요한 수량은 일반적으로 습식 젤 그램 당 10 밀리그램 미만입니다

Cellufine Formyl의 반응 속도는 실용적이기 때문에 빠르지 만 대부분의 단백질에 대해 매우 온화 할 정도로 느리게 느려집니다 또한 제어를 미세하게 측정 할 수 있습니다 최대 단백질 안정성을 달성하기 위해 속도는 온도에 따라 효과적으로 제어 될 수 있습니다 효과적인 커플 링의 pH는 3과 10 사이입니다

커플 링 효율 (결합 된 양과 제공된 양 사이의 비율)과 총 리간드 밀도는 커플 링 리간드 농도, pH 및 온도의 변화를 통해 매우 쉽게 다양하고 최적화 될 수 있습니다 표준 조건 세트는 대부분의 경우에 잘 작동하지만 광범위한 최적화를 사용하여 특정 응용 분야의 프로세스 경제학을 개선 할 수 있습니다