Cellufine2제품인산염
mRNA 약물 합성을위한 효소 인 T7 RNA 폴리머 라제와 같은 핵산 결합 단백질의 정제를위한
Cellufine Phosphate는 농도, 단백질의 정제 및 핵산 관련 단백질과 같은 효소를 위해 설계된 친 화성 배지입니다 매체의 염기는 포스페이트 에스테르와 기능화 된 구형 및 강성 셀룰로오스이다 mRNA 약물의 신타 제인 T7 RNA 폴리머 라제는 핵산-결합 단백질이다
| 특성 | |
|---|---|
| 지원 매트릭스 | Cellulose |
| 리간드 | 포스페이트 에스테르 |
| 리간드 conc | 03-08meq/ml |
| 흡착 용량 | ≧ 20mg/ml-gel (Lysozyme) |
T7 RNA 폴리머 라제의 정제 예
T7 RNA 폴리머 라제는 시험 관내 전사에서 주형 DNA로부터 mRNA를 합성하는 데 사용되는 중요한 RNA 신타 제이다
Cellufine Max Deae로 정화 한 후,
| fraction | 효소 활동 (단위/단백질) |
효소 회복 (%) |
단백질 회복 (%) |
| 로드 샘플 | 94043 | 100 | 100 |
| Flowthrough Fraction | 2763 | 1.8 | 59.8 |
| 용리 분획 | 267034 | 70.2 | 24.7 |
표 1은 셀 루핀 포스페이트로 컬럼 정제 후 효소 활성 및 단백질 회복을 보여줍니다 (그림 1)
1 : Lysate, 2 : 암모늄 설페이트 침전, 3 : 셀 루핀 Max Deae의 용리 분율, 4 : 셀 루핀 포스페이트의 용리 분율, 5 : 대조군
정제 정도는 셀루 핀 MAX DEAE 및 셀 루핀 포스페이트의 각 정제 과정으로부터 얻은 분획을 사용하여 SDS-PAGE에 의해 평가되었다
셀 루핀 포스페이트의 기공 크기
CIP 안정성 테스트
Cellufine Phosphate는 Alkali에 의해 제자리에 청소 (CIp)에 안정적입니다
크로마토 그래피
- 열
- 16x10cm (20ml) 셀 루핀 포스페이트로 포장
- 유량
- 3ml/min (90cm/h)
- 샘플
- 75mg의 rusa d70n heparin-sepharose 크로마토 그래피 후 획득
- 그라디언트
- 50mm tris-HCL pH 80에서 01에서 13m NaCl의 200ml
SDS-PAGE
- 젤
- Novex 4-12%BT 겔 MES-SDS 런닝 버퍼 (Invitrogen)
- 젤의 키
- 1 셀 프리 추출물
2 헤파린-세 파로스 컬럼에서 2 개의 바운드 재료
3 Heparin-sepharose 컬럼에서 얻은 Rusa 샘플
Cellufine Phosphate에서 용리 된 피크의 4-6 분획
7 RUSA 참조 샘플
8 마크 12 MW 표준 (Invitrogen)
9기술 정보
Nucleic Acids Research, 2006, vol 00, No 00 1–8
Rachel MacMaster, Svetlana
Rusa
이 데이터는 Sheffield University의 Svetlana Sedelnikova 박사의 예의에 의해 수행되었습니다
- 열 크기
- ID 11 cm - 높이 10 cm
- 유량
- 2 ml/min (126cm/h)
- 버퍼
- 001m 아세테이트 완충, ph48
- 용리
- 0 ~ 1 mol/l NaCl Gradient
- Cellufine2제품포스페이트
