젤 여과
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Cellufine2기술 정보슬롯 사이트25

빠른 단백질 탈염 버퍼 교환 및 알코올 제거 및 결정

1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거 탈염 매체는 다공성, 구형, 고도로 가교 된 셀룰로오스 입자를 기반으로합니다 급격한 3kd 배제 한계는 단백질이 공극 부피의 컬럼을 통과 할 수있게하고 내부 기공에서 작은 분자량 용액을 지연시킬 수있게한다 뛰어난 기계적 강도는 큰 직경의 공정 스케일 열에서도 높은 유량에서 작동 할 수 있으므로 실행 시간을 최소화합니다

기능

  • 기계적 강력한 구형 입자
  • 효율적인 소금 제거
  • 친수성
  • Pre-Swollen
  • pH 안정 1 - 14 (01m HCl, 05m NaOH)
  • 유기농 솔루션에 대한 저항력
  • 자동 클레이브 가능 (121 ° C, 30 분)

혜택

  • 높은 유량 및 단기 시간 활성화
  • 큰 샘플 하중을 허용합니다 (일반적인 : 5 - 30 분 컬럼에서 1ml에서 100 리터에서 실행 시간이 1ml에서 100 리터로, 하중은 최대 35% 침대 볼륨)
  • 낮은 비특이적 흡착, 높은 회복
  • 쉬운 포장
  • 쉬운 세척 및 탈구
  • 수축 또는 부기없이 일반적으로 사용되는 모든 솔루션 및 버퍼와 함께 사용할 수 있습니다
  • 멸균 가능
특성
Matrix 가교 셀룰로오스
입자 크기 ca 40-130 μm
젤 제외 제한 4웹 상점
효율성 98 % ~ 100 % 회복 250 일 후의 정의 없음, 1000 사이클
자동 클레이브 가능 121 ° C, 30 분
압력 저항 큰 열에서 최대 870 ml/h/cm2 흐름에서 붕괴되지 않음
pH 안정성 PH 1 - 14
화학 저항 결정 및 해리 제에 대한 저항
01m HCL 또는 01M NAOH에서 30 일 후에 변경 사항이 없습니다
공급 20 % 에탄올의 현탁액

흐름 속성

1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거의 흐름 속성
그림 11알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거의 압력/흐름 특성 vs Dextran gel

강성으로 인해 1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거는 거의 두 번 제공
동등한 크기의 덱스 트란 젤의 유량

1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거의 특정 선택 곡선

1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거의 KAV 데이터

1 : 에틸렌 글리콜 (MW62), 2 : PEG (MW200), 3 : PEG (MW400), 4 : PEG (MW600), 5 : PEG (MW1,000), 6 : PEG (MW3,000), A : GLYCINE (MW75), B : Glycineex2 (MW132) C : 글리신 X3 (MW189), D : 글리신 X4 (MW246), E : 칼슘 판토 테 네이트 (MW477), F : 비타민 B12 (MW1,355), G : 인슐린 β 사슬 (MW3,495)

Cellfine GH-25의 특징은 고유 한 분리 패턴입니다 위 그림에서 분자량과 Kav 사이의 관계에서 볼 수 있듯이 분자량 1,000과 3,000의 Kav는 크게 분리되어 있습니다 이것은 단백질과 같은 고 분자량 화합물로부터 저 분자량 화합물의 분리에 매우 유리하다는 것을 나타냅니다

응용 프로그램

  • 동결 화 또는 농도 전 탈염
  • 버퍼 교환
  • 알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거
  • 핵산 정제에서 방향족 화합물 (예 : 페놀)의 제거
  • 단백질을 가용화하는 데 사용되는 결정자 제거 (예 : Triton® X-100, SDS)
  • 수축 또는 부기없이 일반적으로 사용되는 모든 솔루션 및 버퍼와 함께 사용할 수 있습니다
  • Chaotropic Agents의 제거, (예 : Urea, Guanidine)

고속 탈염

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단백질 탈염

1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거는 다양한 단백질로부터 염의 분리를 평가 하였다 다양한 단백질과 염화나트륨의 분리는 매우 날카 롭고 회복 속도는 거의 100%입니다

1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거를 사용한 소포 혈청 알부민 (BSA)의 경우
H26cm x H60 cm VT = 318 ml
이동 상
005 M 암모늄 형태
유량
36 ml/hr, 68 cm/hr
샘플
(i) BSA 30 mg, NACL 150 (ii) 300 mg, NACL 1,500 mg
로드 볼륨
(i) 2ml (ii) 8ml
슬롯 사이트로부터 탈염 된 셀루 핀 GH-25, 암모늄 황산염, 요소 및 구아니딘 하이드로 클로라이드와 함께 리소자임으로부터 다른 유형의 염을 탈염시키는 예
H16CM X H52 CM VT = 104 ml
이동 상
005 M 암모늄 형태
유량
42 ml/hr, 21 cm/hr
샘플
Lysozyme 30 mg 클로라이드 나트륨 150 mg
로드 볼륨
2ml
헤모글로빈, β- 락토 글로빈, 미오글로빈, 시토크롬 C
H15cm x H49 cm VT = 86 ml
이동 상
005 M 암모늄 형태
유량
30 ml/hr, 17 cm/hr
샘플
다양한 단백질 50 mg, NaCl 250 mg
로드 볼륨
2ml

알코올 제거

인간 혈액의 분류와 앨범에서 알코올을 후속으로 제거하는 것은 알부민 생산의 두 가지 중요한 요소입니다 표 1은 두 가지 다른 유량에서 GH-25 겔로 알부민에서 알코올 제거를 비교합니다 유속을 증가시키는 것은 알코올 화 효율, 알부민 회복 또는 샘플 희석에 영향을 미치지 않습니다 나머지 알코올의 농도는 유량에 대해 001 % 미만이었다 29cm/h/cm²에서 100 cm/h/cm²로 유량을 증가시켜주기 시간이 1/4으로 감소했습니다

실행 번호 1 2
젤 유형 슬롯 사이트25 슬롯 사이트25
열 직경 (mm) 50 50
열 직경 길이 (mm) 680 670
젤 볼륨 (ML) 1335 1320
유량 (ml/hr) 570 2010
선형 속도 (ml/h/cm²) 29 102
사이클에 필요한 시간 (HR) 2.3 0.6
제품 적용
프로세스 볼륨 (ML) 310 310
프로세스 볼륨 (% vt) 23 23
알부민 농도 (%) 12 12
에탄올 농도 (%) 4.8 4.8
제품 수집
회수 된 제품 (ML) 546 525
팽창 계수 1PH 1 - 14 15뉴스 레터
회수 된 알부민 농도 (%) 6.6 6.9
남아있는 알코올 농도 (%) 0.002 0.01
알부민의 질량 회복 (%) 97 98

표 1인간 알부민 분류 절차에서 알코올 제거

산업 탈락

크로마토 그래피 적으로 생물학적 분자를 탈염시키는 장점은 대규모 응용 분야에서 명확하게 실현된다 연구에서 파일럿 및 생산 시설에 이르기까지 1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거의 스케일 업은 직접적이고 문제가없는 것으로 입증되었습니다 GH-25의 기계적 안정성은 큰 열에서 높은 유량을 사용할 수 있습니다

하루에 225 리터의 처리를 요구하는 전형적인 대규모 탈염 애플리케이션은 105 x 587 mm 컬럼에서 5 리터의 1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거로 달성 할 수 있습니다 (표 2 참조) 이 강성 겔은 그 컬럼 형상 (870 mL/cm/cm²)에서 유량을 1250 mL/분으로 견뎌냅니다 주사 사이의 사이클 시간은 8 분입니다 대량 부하 (VT의 25 %)는 해상도 나 순도를 희생하지 않고 포장에 의해 수용됩니다

포장 1알코올 또는 기타 유기농 솔루션 제거
열 (mm) 1슬롯 사이트을 가용화하는 데 사용되는 결정자 제거 (예 : Triton® X-100, SDS)
1수축 또는 부기없이 일반적으로 사용되는 모든 솔루션 및 버퍼와 함께 사용할 수 있습니다 51 리터
유량 (ml/min) (Liters/HR) 1250 (75 리터/hr)
선형 속도 870 ml/h/cm²
제품 15M NaCl에서 단백질 5% w/v 단백질
제품 볼륨 127 리터 (VT의 25%)
제품 질량/사이클 136 ml/hr, 68 cm/hr
사이클/일 180
제품 질량/일 1(i) 2ml (ii) 8ml
단백질 질량 회복 1H16CM X H52 CM VT = 104 ml
Salt Exchange 99 % (0015m Final Conc)
샘플 희석 1.13
총 제품 볼륨 복구 257 리터
하루에 처리 된 총 제품 볼륨 225 리터

표 2고속 탈염에 대한 처리량 분석

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