Celfine1CN인산염
mRNA 약물의 신타 제인 T7 RNA 폴리머 라제와 같은 핵산-결합 단백질의 정제를 위해
Celfine Phosphate는 효소 및 핵산 결합 단백질에 대한 친화력 활성을 갖는 크로마토 그래피 충전제이다 포스페이트 그룹은 구형, 매우 기계적으로 강한 셀룰로오스 입자에 고정됩니다
| 기능 | |
|---|---|
| 기본 캐리어 | Cellulose |
| 리간드 | 인산염 그룹 |
| 리간드 농도 | 03-08meq/ml |
| 단백질 흡착량 | ≧ 20mg/ml-gel (lysozyme) |
T7 RNA 폴리머 라제의 정제의 예T7 RNA 폴리머 라제의 정제
T7 RNA 폴리머 라제는 시험 관내 전사 합성에서 주형 DNA로부터 mRNA를 합성하는데 사용되는 매우 중요한 RNA 신타 제이다
Cellfine Max Deae로 정제 한 후, 셀 핀 Fosfate로 정제됩니다 T7 RNA 폴리머 라제는 적색으로 표시된 EL2 분율로 축적된다
| fraction | 효소 활동 (단위/단백질) |
효소 활동 회복 속도 (%) |
단백질 회복 (%) |
| 샘플로드 | 94043 | 100 | 100 |
| 분수 이해 | 2763 | 1.8 | 59.8 |
| 용리 된 분수 | 267034 | 70.2 | 24.7 |
Celfine 표 1은 인산염으로 컬럼 정제 후 효소 활성 및 단백질 회복 속도를 보여줍니다 (그림 1)
1 : Lysate, 2 : 암모늄 설페이트 침전, 3 : Cellfine Max Deae 용리 분획, 4 : 셀 피네 포스페이트 용리 분획, 5 : 상업적 대조군
정제 정도는 Cellfine Max Deae 및 Cellfine Fosfate 정제 과정으로부터 얻은 분획을 사용하여 SDS-PAGE에 의해 평가되었다
셀프 핀 포스페이트의 기공 특성
CIP 스탠딩 청소 (CIP) 안정성CIP 안정성 테스트
Celfine Phosphate는 안정적이며 02m NaOH 수용액에서 반복적으로 사용할 수 있습니다
운영 조건
- 열
- 16x10cm (20ml)
- 유속
- 3ml/min (90cm/h)
- 샘플
- 75mg rusa d70n (헤파린-면역화 된 캐리어의 정제 후 샘플)
- 그라디언트
- 200ml, 01m → 13m NaCl 50mm tris-HCl pH 80
SDS-PAGE
- 8기술 칼럼
- Novex 4-12%BT 겔 MES-SDS 런닝 버퍼 (Invitrogen)
- 레인 정보
- 1 세포 제거 후 추출물
2 헤파린 면역화 된 캐리어에서 흡착되지 않은 분획
3 헤파린-이량화 된 캐리어 흡착 분획 RUSA
4-6 셀 핀
7 Rusa Pure Sample
8 마커 12 MW 표준 (Invitrogen)
참조
Nucleic Acids Research, 2006, vol 00, No 00 1–8
Rachel MacMaster, Svetlana
9자주 묻는 질문
이 데이터는 Sheffield의 Svetlana Sedelnikova 박사의 예의에 의해 수행되었습니다
단백질 분리 특성
Celfine Phosphate는 염 농도를 변화시켜 단백질 분리를 허용합니다 그것은 양이온 교환기처럼 작동하지만 전형적인 양이온 교환기보다 높은 소금 농도에서 용출하는 경향이 있습니다
- 열
- ID 11 cm - H 10 cm
- 유속
- 2 ml/min (126cm/h)
- 밸런싱 버퍼
- 001M 아세테이트 완충액, pH48
- 용리 버퍼
- 0 → 1 mol/l NaCl Gradient
- Celfine1CN인산염
